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仪器技术发展趋势
加压毛细管电色谱(pCEC-Pressurized Capillary Electrochromatography System )是近年发展起来的一种新型微分离分析技术,它整合了毛细管电泳与液相色谱的优点。在双重分离机制的作用下, pCEC对于被分离样品细微之处的分辨能力得到了极大的提高,代表了分析学界高效微分离的趋势。
与传统高压液相分析技术相比,毛细管电色谱更短的分析时间,更细的柱内体积和更为快速的分离速度使其比之高压液相分析仪消耗更少的溶剂量,并由此产生更少的废液,大大节约了成本,保护了环境。
仪器生产公司背景
TriSepTM- 2100加压毛细管电色谱是美国通微股份有限公司研发生产的国际首台商业化加压毛细管电色谱。
美国通微技术股份有限公司(Unimicro Technologies, Inc.)是国际**的专业微分离分析的仪器制造商,多年来一直致力于电色谱及多维微分析仪器的研发、制造及应用推广。
作为微分析技术的***,通微于1999年推出了世界上首台专用的加压毛细管电色谱仪TriSepTM-2000,2004年,美国通微再度推出第三代功能更强大的毛细管电色谱系统TriSepTM- 2100。
仪器简要介绍
该TriSepTM- 2100加压毛细管电色谱系统是建立在拥有多项**技术的2010型基础上,配以**生产的ElectroPakTM 系统毛细管色谱柱,采用1.5µm超细颗粒填料,柱效更高,峰形更好,峰容量更大。
实现了多种检测模式。尤其与质谱联用技术、激光诱导荧光检测技术,为蛋白质组学、神经生物学、天然药物等研究领域提供了创新的技术手段。
仪器原理
通过在填充有HPLC填料的毛细管电色谱柱两端施加高压直流电场,样品在毛细管色谱柱中的保留行为同时受到电渗流及其在流动相与固定相之间分配系数的影响,大大提高了样品分离能力。
毛细管电色谱结合了毛细管电泳和高效液相色谱的动力优势,不单纯依靠压力驱动色谱柱内流动相的流动,还通过在毛细管柱两端加上电场所产生的电场力驱动溶剂的流动,大大降低了柱内压力。因此在用毛细管电色谱仪进行分析时,我们可以使用内径细小的毛细管色谱柱,超小粒径填料(1.5μm或3μm)而不用担心高反压,大大提高了理论塔板数和分离效果。
相对于液相色谱微升级进样量,毛细管电色谱的分析量只为纳升级,在活体取样时就体现出了其巨大优势。常规液相色谱无法分析纳升级的样品,过多的取样量往往会致死本体。
应用范围
已经在生命科学、中药研究、药物分析、环境保护、食品安全、化学化工等领域得到广泛应用
尤其适用于复杂生物及化学体系的研究
仪器连用
结合毛细管柱上检测技术,pCEC 可与紫外检测器(UV )、荧光检测器(FLD)、激光诱导荧光检测器(LIF)、电化学检测器(ECD)及质谱(MS)等多种检测手段联用
仪器特点
超高效分离:25万以上理论塔板数/米
超快速分离:30秒钟完成4种样品的分离
超高峰容量:3倍于高效液相色谱的峰容量
超高精度分离:重现性与液相色谱媲美
仪器模块介绍
稳定的纳升级二元溶剂梯度输送系统 pCEC将高压泵运用于CEC系统中,液体在液压和电渗流的共同作用下通过毛细管色谱柱。该系统可稳定输送几百纳升级的流量,液压和电压可同时或独立地施加于毛细管色谱柱的两端,程序可调。
加压毛细管电色谱拥有几项明显的优势:(1)可有效地抑制分离体系中气泡的产生;(2)由于采用了压力流和阀进样等方法,可方便地实现二元溶剂梯度洗脱,提高了分析方法的灵活性、选择性和分析速度;(3)采用阀进样保证了进样的定量和重复性;(4)压力流和进样阀的存在,使该系统可与样品处理相联,实现实时、在线样品分析;(5)从进样到分离及多次连续操作的整个分析过程中,高压电场不间断,保证了系统的稳定性和分析的重现性。
微流控制系统
微流控制部分由分流阀、反压阀、溶剂混合阀、定量进样阀和限流阀等部件组成。分离毛细管色谱柱端维持恒定的柱前压是体系稳定的关键,通过分流阀和反压阀配合来实现。溶剂由高压泵以恒流的形式泵出,在分流阀处转为恒压的形式驱动,从而与高压电场的电渗流匹配,实现对色谱柱内溶剂和样品的压力和电场的同时驱动。50微升小体积混合阀用以实现二元溶剂的梯度混合,在保证混合效率的同时,抑制了梯度的延时,保证了分析的准确性和重现性。定量进样阀为定容进样,用以保证进样的准确度和精度。限流阀的作用是在分析毛细管色谱柱的出口端保持一定的压力,从而抑制压力骤然变化引起的气泡的形成,保证分析系统的稳定性。微流控制部分的连接管路内径与定量进样阀接口处的孔径相同,从而在**程度上减小了进样死体积和柱外体积的影响。
纳升级高精度定量进样阀 美国通微技术股份有限公司与V.I.C.I.联合开发了世界上进样体积*小的高精度纳升级旋转式定量进样阀。该阀采用内置定量环的方式,通过刻蚀的方法实现纳升级定量环的加工。采样环的出口通道为100微米,并可通过PEEK接头直接与100微米内径的毛细管色谱柱相联,极大地抑制了死体积的影响。该进样阀的精度高,相对标准偏差小于1%,进样准确度好,相对标准偏差小于2%。该纳升级定量进样阀在5000psi的压力下仍可正常工作,无任何渗漏现象。
首创电动填充毛细管色谱柱
**实现电动填充技术制备内径为50—320um的毛细管填充色谱柱,已经开发的填充柱有C18柱、C8 柱、硅胶柱、氰基柱、氨基柱、阴阳离子交换柱、手性柱和亲和柱等上百种毛细管电色谱柱,内径通常为50um、75um、100um,150 um,填充长度可任意选择。各种柱子的性能及应用表明填充技术稳定可靠、重现性好。
紫外/可见光检测器和激光诱导荧光检测器 通微研制开发了毛细管色谱仪专用的柱上检测池,检测池采用专门设计的光学结构和液路结构,保证了较高的光学利用率,同时采用柱上检测提高了分析效率,对于整机提高灵敏度和柱效具有很好的作用。
通微的TriSepTM-2100激光诱导荧光检测器通过其独特的光学设计,检出限可以达到10-13 mol/l (10-21 mol),是世界上目前为止*灵敏的商品化的激光诱导荧光检测器。
高压电源
高精度的高压电源采用自行设计的控制和显示电路以及微电流测量电路。该电源输出稳定,精度高。输出范围宽,0~±30kV,完全可满足毛细管电色谱和毛细管电泳的需要;具有输出短路保护;低能量残余;具有可靠的外壳屏蔽性能。
仪器标准配置 Standard Components
部件名 | 数量 |
TriSep-2100 二元微量高压输液泵 Binary Solvent Delivery (1μl/min~10ml/min) | 1 |
微流控单元 Micro Fluidic Module | 1 |
TriSep-2100 紫外/可见光检测器 UV/VIS Detector (190—600nm,配2000小时D2氘灯) | 1 |
TriSep-2100 可编程高压电源 Programmable High Voltage Power Supplier (-30kV~+30kV ) | 1 |
溶剂托盘 Bottle Stock | 1 |
数据采集软件 Unimicro Workstation 2003 | 1 |
电动纳升级进样阀 Nano Injection Valve Module | 1 |
3μm C18毛细管色谱柱 Packed Capillary Column,C18,3μm | 1 |
其他标准配件 Standard Accessories Kit | N |
可选组件列表 Alternative Components
部件名 | 数量 |
TriSep-2100 激光诱导荧光检测器 Laser Induced Fluorescence Detector | 1 |
各种毛细管色谱柱 Packed Capillary Column | D |
德国肖特 100ml 溶剂瓶 Solution Bottle | D |
笔记本电脑 Laptop | 1 |