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DBSA是用于分析干血点的自动进样器。只需从指尖取几滴血滴在特殊纤维卡片上的小圆形区域上,一旦血滴干燥,卡片就用于储存和运输样本,样本可以使用专用的取样设备直接从卡片中提取。
干血点取样过程,将血点滴再专用的纤维卡片上,待血液干燥后, 便可以进行储存和运输以及后续的分析
自20世纪60年代以来,干血点(DBS)取样一直被使用。*初,特别是对新生儿代谢紊乱的筛查就是基于DBS技术进行的。近年来,特别是随着GC/MS和LC/MS技术的分析灵敏度和重现性越来越高,DBS在其他分析领域也开始受到重视,例如在药物研究、法医毒理学和兴奋剂分析以及兽医分析。
在纤维卡上,*左边的一个血点被解析采样
DBS样品通常含有15到30 μL的血液,均匀分布在采样点上。这意味着一个有代表性的样本,即一定量的血液,可以通过简单地冲孔打出一小块血点来采集。传统上,一个直径几毫米、轮廓清晰的小圆盘从血点被冲孔打出,转移到小瓶或微量滴定板上,在那里用合适的溶剂提取。将所得萃取物离心分离,并在溶剂交换后立即净化或分析上清液。通常,LC-MS/MS或GC-MS/MS是所使用的分析技术。上述程序基于DBS卡的手动样品制备。
为了提高通量和简化常规分析工作流程,DBS技术必须适当地自动化。GERSTEL与Spark Holland B.V.合作,开发了一个基于Spark DBS系统的集成系统,可从多达240张DBS卡上进行全自动采样。在MAESTRO软件的控制下,使用GERSTEL多功能全自动样品前处理平台(MPS)实现自动化。该系统可以作为一个独立的工作站运行,为LC/MS分析准备样本,或者与LC-MS/MS系统集成。简单得来说DBS-MPS-LC-MS/MS系统*的工作原理如下:
自动化干血点解析和上样过程
MPS将一张DBS卡传送到相机。图像识别软件评估干血点并选择**的解吸点。然后将卡装入解吸接口并夹紧到位。然后用于解吸的洗脱液会流过血点的指定区域,使用的是**的通流解吸技术(FTDTM)解吸分析物(如上图);如果需要,可在解吸洗脱液中添加内标以达到定量的目的以及进一步执行洗脱液净化步骤。解吸,加内标,净化的步骤都是通过在线SPE系统(GERSTEL-SPExos)来实现的。
在线SPE系统(GERSTEL-SPExos)基于可替换的SPE小柱,确保了样品与样品之间*小的交叉污染,同时有效地将分析物转移到LC-MS/MS系统中,以得到**的回收率以及LOD。*后,进样器释放DBS卡并用溶剂彻底冲洗相关管道。再次对DBS卡进行拍照,以便能够完整记录已被解吸的样品区域。
下图是SPExos的工作流程,可以直接把解吸下来的干血点在SPE小柱进行上样,净化和洗脱,然后直接把分析物100%的转移到LC-MS/MS系统中。
自动化干血点自动进样器 DBSA
基于MPS的GERSTEL DBSA干血点自动进样器(左侧)和SPEXO&>S模块(右侧),直接连接到LC-MS/MS系统(未显示)
哲斯泰高效兴奋剂检测方案,整体设备DBS-A,SPEox,HPLC-MS/MS