【应用】微量凯氏定氮法在乳制品中的应用

2025-07-22 　来源：步琦实验室设备贸易（上海）有限公司　>>进入该公司展台　

微量凯氏定氮法

在乳制品中的应用

凯氮应用

简介

本文介绍了一种测定乳制品总蛋白质含量的简便可靠的方法，按照“微氮”方法进行样品消化，显著减少了化学试剂和消耗品的使用，从而带来了生态和经济上的双重优势。使用全自动凯氏定氮仪 K-375 和进样器 K-376 / K-377 按照标准进行蒸汽蒸馏，随后进行电位滴定法进行滴定。

设备

尾气吸收仪 K-415（114152331）
消解仪 K-449 （1154492000）
凯氏定氮仪 K-375/K-377（113751720）
样品管 300 mL（037377）
分析天平（精度±0.1 mg）

化学品与材料

化学品：

浓度 98% 的硫酸，默克公司（1007482500）
凯氏定氮片（11057980）
32% NaOH
2% 硼酸，pH 值调至 4.65
硫酸 0.01mol/L

为确保安全操作，请注意所有相关的材料安全数据表（MSDS）！

标准样品：

蛋白质含量标为每 3.7g/100g 酸奶
蛋白质含量标注为每 9.7g/100g 夸克奶酪
标签上标明蛋白质含量为 32g/100g 帕尔马干酪

实验流程

4.1 消化方法 - 样品

按照表1 中的说明，将每个样本放入 300mL 的样品管中。
加入 2 片催化片和 8mL 浓度为 96% 的硫酸。
准备额外的空白和化学试剂，不包含样品。
连接 K-415 与 K-449，以吸收消化过程中产生的酸性烟雾。

按照表1 中所列参数启动消解程序。

加热步骤	温度 [摄氏度]	时间 [分钟]
预热	350	-
1	420	120
冷却	-	30

4.2 蒸馏与滴定

按照表2 中所列参数蒸馏样品。

表2： K-375/K-376 蒸馏和滴定的参数

4.3 计算

结果以氮的百分比计算得出。为了计算样品中的蛋白质含量，需将氮含量乘以特定样品的蛋白质系数。以下公式（1）、（2）和（3）用于计算结果。

结果

5.1 色氨酸的回收率

表3 列出了色氨酸分析（含量＞99%）的氮测定结果及回收率。色氨酸的理论氮含量为 13.72%。回收率在98% - 102% 的规定范围内。

色氨酸	m_Sample [g]	V_Sample [mL]	% NTry	回收率 [%]
示例 1	0.0283	14.220	13.53	98.65
示例 2	0.0302	15.289	13.67	99.67
平均值 [%]	-	-	13.60	99.16
相对标准偏差（%）	-	-	0.73	0.73

空白体积的平均值 (V_Blank) 为 0.3985 mL（n = 2）。

5.1 乳制品中蛋白质的测定

乳制品中氮和蛋白质含量的测定结果见表4 至表6。

表4：酸奶中氮和蛋白质含量测定结果（标示蛋白质含量为 3.7g/100g）。

酸奶	m_Sample [g]	V_Sample [mL]	% N	百分比 P
示例 1	0.258	6.821	0.68	4.34
示例 2	0.2545	6.306	0.63	4.04
示例 2	0.2702	6.591	0.63	4.00
平均值 [%]	-	-	0.65	4.13
相对标准偏差（%）	-	-	4.58	4.58

空白体积的平均值 (V_Blank) 为 0.381 毫升（n = 2）。

表 5：夸克奶酪（标示蛋白质含量 9.7g/100g）中氮和蛋白质的含量。

夸克奶酪	m_Sample [g]	V_Sample [mL]	% N	百分比 P
示例 1	0.1591	10.216	1.70	10.86
示例 2	0.179	10.94	1.63	10.37
示例 2	0.1444	9.019	1.64	10.48
平均值 [%]	-	-	1.66	10.57
相对标准偏差（%）	-	-	2.40	2.40

表6：帕尔马干酪中氮和蛋白质含量测定结果（标示蛋白质含量 32g/100g）

帕尔马干酪	m_Sample [g]	V_Sample [mL]	% N	百分比 P
示例 1	0.1261	22.684	4.92	31.37
示例 2	0.1168	20.877	4.88	31.10
示例 2	0.1411	25.052	4.86	31.03
平均值 [%]	-	-	4.89	31.17
相对标准偏差（%）	-	-	0.57	0.57

结论

使用消解仪 K-449 和全自动凯氏定氮仪 K-375 / K-376 通过电位滴定法测定乳制品中的氮和蛋白质，可获得可靠且重现性好的结果，相对标准偏差低（RSD）。微量凯氏定氮法减少了消解过程中硫酸和催化剂的用量，也减少了蒸馏步骤中 NaOH 的用量。化学试剂用量的节省为经典凯氏定氮法带来了经济和生态方面的双重优势，同时又保持了其高精度和高准确度。

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