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1概述

对于某些应用场景，只有少量样品可用于使用多种技术进行分析。在制药研究中，拥有 1 ml或更少蛋白质样品并需要进行多次分析并不罕见。AccuSizer® 能使用小体积测量颗粒大小和浓度，本篇文章将提供AccuSizer用于微量样品颗粒浓度检测的实际案例。

2介绍

单颗粒光学测量（SPOS）是一种可以提供高准确性和分辨率的颗粒大小和数量分析技术。通过让悬浮在液体中的颗粒通过LE-400的传感器，通过光阻挡和光散射的双重探测器同时得到关于粒径大小和颗粒数量的结果，通过进样体积得到样品的颗粒浓度，因此，在测量的过程中样品的体积必须是确定的。本文通过测量不同体积的样品，来验证AccuSizer A2000 SIS对于样品体积，颗粒大小和浓度的准确性。

3材料和方法

用于进行本技术说明中描述的所有测试的样品是来自MML公司的 15 μm标准粒子，批号为 NK20C。该标准粒子的浓度为3,118-4,218个/毫升。所有的测量是基于美国PSS粒度仪的AccuSizer  SIS产品，使用LE-400传感器，校准和使用的流速为15mL/min。在AccuSizer 780 A2000 SIS安装一个1mL的注射器型进样器，使用的测量程序如下所述：

• 在测试之前用0.5ml的清洗液进行冲洗；

• 所有测试的样品，都取自相同规格900μl的标准样品；

• 在抽取样品之前的气隙为0.05mL；

• 每次测量时注射器的净体积为0.15mL；

测量是在以下样品体积下进行的：650、550、450、350、250、150 和 50 μl。所有测量均进行了三次

4结果

实验结果如下图中的表1和下一页中的图1所示。

表1. 650、550、450、350、250、150 和 50 μl实验数据

图1. 样品体积与颗粒数线性图

所有浓度实验都在颗粒计数标准的合格/不合格标准内得出结果。图 1 中呈现的结果展示了样品体积和计数之间预期的、良好相关的线性关系。

5结论

这项研究证明了 AccuSizer SIS 系统即使在低样品体积下也能生成准确的大小和计数数据。虽然数据在 50 μL 时仍准确，我们建议尽可能使用稍大一些的样品体积，以便降低操作人员的测量难度。